(一)IVF動物實驗目的

　　通過動物實驗，可熟練IVF基本的操作技能。用鼠胚進行培養，觀察其發育情況，可從中了解培養液的質量(是否過期變質、滲透壓、酸堿度改變以及毒性物質的污染)及培養箱的環境(水分、c02濃度、溫度)是否適合胚胎的生長。

　　(二)促排卵藥物

　　1．PMS或HMG-

　　2．HCG配成50Iu／m1

　　3．培養液①Earle’s液或DMEM液；②PBl沖洗液。

　　(三)操作方法

　　1．小鼠配子(精子、卵子)體外受精法舉例如下：

　　(1)周一：5：00pm選雌鼠(25～30g)10只，腹腔內注射PMS(50IU／m1)0．2rnl(約10 IU)。

　　(2)周三：5：00pm再注射HCG(5011J／m1)0．2ml。

　　(3)周四：10：00am解剖雄、雌鼠，取出其輸卵管、輸精管。

　　 (4)在實體顯微鏡下取出精子、卵子後聯合培養。

　　 (5)周五上午觀察受精情況，將有受精、分裂為2細胞的胚胎吸出，放置另一個培養皿內繼續培養2天，觀察受精卵細胞分裂至前階段。

　　細胞胚胎沖洗收集法舉例如下：

　　 (1)周一：11：00am取雌鼠數只注射PMS 10 IU。

　　(2)周三：11：00am注射HCG 10 IU後雌鼠與雄鼠(1：1)合籠交配。

　　(3)周五：9：00am解剖雌鼠，取出輸卵管，在實體顯微鏡下用一支細小的針頭插入輸卵管的末端，將受精卵沖出來，收集2細胞的胚胎進行培養觀察。

　　操作要點：整個實驗過程要快、保溫，使pH的變化不大，做到無菌操作等。